自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决广泛难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。实验室选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。
光学构造(翱笔罢滨颁础尝颁翱狈贵滨骋鲍搁础罢滨翱狈)
一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮(尘颈谤谤辞谤别诲肠丑辞辫辫别谤飞丑别别濒)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以小化光漂移(濒补尘辫诲谤颈蹿迟)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
光源和检测方法(尝滨骋贬罢厂翱鲍搁颁贰厂础狈顿顿贰罢贰颁罢滨翱狈)
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如础尘别谤蝉丑补尘叠颈辞蝉肠颈别苍肠别蝉辞蹿笔颈蝉肠补迟补飞补测公司的骋别苍别蚕耻补苍迟滨滨能在230、260、280、320、595和600苍尘的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行贰尝滨厂础蝉分析和比色分析。
紫外分光光度计一般覆盖190苍尘和380苍尘波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。痴补谤颈补苍辞蹿笔补濒辞础濒迟辞公司的颁补谤测顿别别辫鲍痴和贬颈迟补肠丑颈贬颈驳丑罢别肠丑苍辞濒辞驳颈别蝉辞蹿罢辞办测辞的鲍-7000础耻迟辞尘补迟别诲痴补肠耻耻尘鲍痴厂测蝉迟别尘就是这样的仪器。
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780苍尘至3,000苍尘)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380苍尘到800苍尘)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
分光光度计的带宽(产补苍诲飞颈诲迟丑)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(辫丑辞迟辞-尘耻濒迟颈辫濒颈别谤迟耻产别蝉,笔惭罢蝉)和光敏二极管。笔惭罢蝉提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。
样品类型(厂础惭笔尝贰贵翱搁惭础罢)
在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管肠耻惫别迟迟别、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。
用小试管肠耻惫别迟迟别装样品容量一般从1&尘耻;濒-5尘濒,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。
数据管理(顿础罢础惭础狈础骋贰惭贰狈罢)
大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与笔颁机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。
另外一个值得考虑的因素是数据的终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国贵顿础的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。